梯度稀释计算器
单步稀释 C1V1=C2V2、等比多管系列逐管加样表、储存液倍数反推,附移液可行性建议与方案一键复制
在线梯度稀释计算器(serial dilution calculator):三种模式覆盖实验室常见稀释场景——按 C1V1 = C2V2 做单步稀释、 按固定稀释因子排 2-12 管等比系列(经典 9 mL + 1 mL 的 1:10 系列)、从 1000× 母液反推取液量与补溶剂量; 逐管表给出每管应加入的上管液体积、稀释液体积与终浓度,并对照移液枪量程标注加样量是否可精确定量, 方案文本可一键复制到实验记录本。全部计算在浏览器本地完成,不上传任何数据。
结果按体积可量取精度给出移液建议(<10µL 提示换大体积配方),实验前请复核;无菌/细胞实验以实验室 SOP 为准。
稀释参数
V1 = C2 × V2 ÷ C1,溶剂取 V2 − V1;C1 与 C2 须为同一单位。
快速预设
稀释方案
吸取原液 V1
500 µL
加溶剂
9.5 mL
稀释倍数
20 倍
操作:吸取 1 mg/mL 原液 500 µL, 加溶剂 9.5 mL 定容至 10 mL,混匀后即得 0.05 mg/mL。
推荐 P1000 量程移液枪吸取 500 µL
打印请用浏览器打印(⌘/Ctrl + P),打印版只保留方案表。
质量浓度换算(mg/mL ↔ µg/mL ↔ ng/µL)
换算链:1 mg/mL = 1000 µg/mL;1 µg/mL = 1 ng/µL(每 mL 恰含 1000 µL,数值 1:1 对应)。
换算口径提醒
质量浓度互转不含摩尔换算:mg/mL ↔ µM 需要溶质的分子量,请用站内 分子量计算器 先求得摩尔质量再按 c = (mg/mL × 1000) ÷ M 换算。
#梯度稀释计算器是什么?
梯度稀释计算器是一款面向生物、医学、化学实验室的在线稀释计算工具。它内置三种模式:单步稀释按 C1V1 = C2V2 求出需要吸取的原液体积、补加的溶剂体积与稀释倍数;等比多管模式按固定稀释因子逐管推算 2-12 管系列的每管终浓度、 每管应加入的上管液体积与稀释液体积(即经典「9 mL 稀释液 + 1 mL 样品」的 1:10 系列排法),并对照移液枪量程标注可行性; 储存液反推模式从 N× 浓缩母液直接算出配指定终体积工作液的取液量。结果方案可一键复制成可抄进实验记录本的文字, 打印时只保留方案表。全部计算在浏览器本地完成,不上传任何数据。
稀释因子和稀释倍数是一个意思吗?
多数文献里二者混用,但「1:10」这个记法有真实歧义:微生物学的通行约定是 1 份样品 + 9 份稀释液、总体积 10 份, 稀释因子 = 终体积 ÷ 样品体积 = 10;而少数配方文本把 1:10 写成「1 份样 + 10 份液」的体积比,实际因子是 11。 本工具一律按「体积终 ÷ 原样」口径计算:稀释因子 = 每管终体积 ÷ 加样体积 = C1 ÷ C2,输入 1:10 系列时填 10 即 100 µL + 900 µL。 读他人 SOP 时务必先看它用的是哪种记法。
为什么要做系列稀释?
菌落计数(平板涂布/倾注法)要求单皿长出 30-300 个菌落才具统计意义:原液动辄 10⁷-10⁹ CFU/mL,直接涂板会长成蔓延的一片, 无法计数;而一步稀释到可数范围往往需要吸取不到 1 µL 的体积,超出移液枪精度。等比系列稀释(10⁻¹、10⁻²……) 让每一步加样量都保持在量程内,再各取末几位稀释度涂板,就能落在 30-300 CFU 的可数区间。本工具的逐管表就是为排这种系列设计的。
移液枪量程怎么选?
原则是用「能覆盖目标体积的最小量程枪」,并在其量程的中上部使用(量程下限附近相对误差急剧增大):P10 取 1-10 µL、 P20/P200 取 20-200 µL、P1000 取 100-1000 µL。本页对所有加样量做可行性标注:当每管需吸取的体积 < 10 µL 时给出红字提示, 建议把每管终体积整体放大(例如从 100 µL 放大到因子×10 µL)或改用分刻度移液枪,而不是硬用小量程枪吸接近下限的体积。
每管终体积怎么定?
按下游用途倒推并留余量:涂布平板每稀释度至少取 0.1 mL,通常每管备 ≥ 1 mL 才够做多支稀释度和复孔; 96 孔板检测按孔体积 × 孔数加 20% 蒸发/死体积余量;只做比色读取 100-200 µL/管 即可。终体积越大, 同因子下的加样体积越接近移液枪量程中部,系列越可精确复核——这也是小体积系列被建议整体放大的原因。
无菌操作提示
一句话:每换一管必换新枪头、在酒精灯火焰旁或生物安全柜内操作、管口与盖内面过火灭菌,稀释液(生理盐水或缓冲液)须与样品无菌等效。
#常见问题 (FAQ)
1:10 稀释到底加多少稀释液?
按本工具的「体积终 ÷ 原样」口径,1:10 表示终体积是样品的 10 倍:1 mL 样品要加 9 mL 稀释液(100 µL + 900 µL 同理)。若你的实验手册把 1:10 定义为体积比(1 份样 + 10 份液),因子应填 11。
每管只需要吸 5 µL,还能做吗?
不建议:低于 10 µL 已进入多数移液枪的误差放大区,逐管误差还会沿系列累积放大。把每管终体积按因子倍数整体放大(表内红字会给出建议体积),或改用分刻度移液枪,精度会显著改善。
mg/mL 能换算成 µM 吗?
本工具只做同单位与质量浓度链(mg/mL ↔ µg/mL ↔ ng/µL)的数值换算,不做摩尔换算——那需要分子量:先用站内分子量计算器求得摩尔质量 M,再按 µM = mg/mL × 10⁶ ÷ M 换算。
计算结果可以直接用于无菌实验吗?
数值可以直接抄用,但无菌/细胞实验的关键步骤(培养基、血清、胰酶等热敏感组分与活菌计数场景)以实验室 SOP 和质控为准,本工具按体积量取精度给出提示,不能替代复核。
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